Biotek洗板機校準步驟_新手實操指南
Biotek 洗板機作為實驗室酶聯(lián)免疫檢測的核心自動化設(shè)備,校準精度直接決定洗板效果和實驗數(shù)據(jù)準確性,長期未校準或校準操作不規(guī)范,會出現(xiàn)加液不均、吸液殘留、針位偏移等問題,進而導(dǎo)致實驗結(jié)果失真。本文為實驗室新手整理了通用型 Biotek 洗板機(ELx405/ELx800/ELx50 等主流機型) 全套實操校準步驟,全程無專業(yè)設(shè)備要求,步驟簡單易上手,適配實驗室日常校準需求,同時附新手校準避坑要點,確保校準一次達標(biāo)。

一、校準前必備準備(新手必看,避免校準失?。?/h2>
1. 設(shè)備與耗材準備
準備適配 Biotek 洗板機的空白酶標(biāo)板(96 孔)、無酶蒸餾水、10ml 移液管、電子天平(精度 0.01g)、吸水紙、洗板機專用校準程序(部分機型內(nèi)置,無需額外下載)、設(shè)備操作手冊;
2. 設(shè)備前期檢查
- 開機前檢查洗板機加液針、吸液針無堵塞、無彎曲,管路連接無松動、漏氣,洗液瓶加足量蒸餾水,廢液瓶清空;
- 啟動洗板機,執(zhí)行管路沖洗程序(默認沖洗 2 次),清除管路內(nèi)殘留洗液或雜質(zhì),避免校準受污染影響;
- 確認洗板機無故障報警,載架、清洗頭升降靈活,針位無明顯偏移,基礎(chǔ)功能正常。
3. 校準環(huán)境要求
放置在水平、平穩(wěn)的實驗臺,避免震動;環(huán)境溫度 20-25℃,濕度 40%-60%;遠離強磁場、腐蝕性氣體,避免陽光直射。
二、Biotek 洗板機核心校準步驟(新手實操版,按順序操作)
本次校準覆蓋 Biotek 洗板機加液量校準、吸液效率校準、針位校準、系統(tǒng)參數(shù)校準四大核心模塊,為通用流程,不同機型僅操作界面略有差異,可對照設(shè)備手冊微調(diào)。
(一)加液量校準(最核心,新手優(yōu)先掌握)
加液量偏差是實驗誤差的主要原因,校準目標(biāo)為單針加液量誤差≤±2%,整板加液量均勻性≤±3%,步驟如下:
- 取 1 塊空白 96 孔酶標(biāo)板,用電子天平稱重并記錄初始重量(記為 M1),平穩(wěn)放置在洗板機載架上,確保夾緊固定;
- 進入洗板機操作界面,找到校準模式(部分機型標(biāo)注為 “Calibration”),選擇 “加液量校準”,設(shè)置單孔加液體積(常規(guī)設(shè)置 100μl/200μl,按實驗室常用參數(shù)選擇),校準板位選擇 “整板”;
- 啟動校準程序,洗板機完成整板加液后,暫停設(shè)備,小心取出酶標(biāo)板,用吸水紙輕輕吸干板外殘留液體(避免觸碰微孔內(nèi)液體);
- 再次用電子天平稱重酶標(biāo)板(記為 M2),計算實際平均加液量:(M2-M1)/96 / 液體密度(蒸餾水密度 1g/ml,直接換算為 μl);
- 若實際加液量與設(shè)置值偏差超過 ±2%,進入操作界面 “參數(shù)調(diào)整”,找到 “加液量補償”,按偏差值調(diào)整補償參數(shù)(如設(shè)置 100μl,實際 98μl,補償 + 2μl);
- 重復(fù)上述步驟 1-5,直至實際加液量誤差符合標(biāo)準,保存校準參數(shù)(部分機型自動保存,手動機型需按 “Save” 確認)。
(二)吸液效率校準(避免微孔殘留,影響實驗結(jié)果)
吸液效率校準目標(biāo)為單孔吸液殘留≤1μl,整板無明顯殘留差異,新手實操步驟:
- 向空白 96 孔酶標(biāo)板內(nèi)用移液管精準加入 200μl 蒸餾水 / 生理鹽水(模擬實驗洗液),將板放置在洗板機載架上固定;
- 進入洗板機校準模式,選擇 “吸液效率校準”,設(shè)置吸液參數(shù)(與實驗室常規(guī)洗板參數(shù)一致,如吸液壓力 50kPa、吸液時間 2s);
- 啟動校準程序,完成整板吸液后,取出酶標(biāo)板,用吸水紙輕拍板底,觀察微孔內(nèi)是否有液滴殘留,重點檢查板的四角和邊緣孔;
- 若發(fā)現(xiàn)單孔 / 多孔有殘留,進入操作界面 “吸液參數(shù)調(diào)整”,適當(dāng)提高吸液壓力(每次 + 5kPa)或延長吸液時間(每次 + 0.5s),避免壓力過高損壞針管;
- 重復(fù)校準至所有微孔無明顯殘留,保存吸液校準參數(shù);若個別針位持續(xù)殘留,暫停校準,檢查對應(yīng)吸液針是否堵塞,疏通后再重新校準。
(三)針位校準(避免加液 / 吸液對位不準,漏液 / 吸液失?。?/h3>
Biotek 洗板機針位分水平針位和垂直針位,新手校準無需拆機,僅通過操作界面和機械微調(diào)即可:
- 垂直針位校準:啟動清洗頭升降程序,讓加液針 / 吸液針緩慢下降至接近酶標(biāo)板微孔底部,觀察針管是否垂直對準微孔中心,若針位偏移,用手輕推清洗頭兩側(cè)微調(diào)鈕(部分機型為旋鈕式),直至所有針管垂直對準微孔,擰緊微調(diào)固定螺絲;
- 水平針位校準:在酶標(biāo)板每個孔位邊緣貼一小片白色標(biāo)簽紙,啟動清洗頭水平移動程序,讓針管緩慢劃過標(biāo)簽紙,觀察針管劃痕是否與孔位對齊,若偏移,進入操作界面 “水平偏移補償”,按左右 / 前后偏移距離調(diào)整參數(shù)(單位 mm);
- 針位調(diào)整完成后,放入空白酶標(biāo)板,執(zhí)行一次標(biāo)準洗板程序,觀察加液時無漏液、吸液時無錯位,即針位校準達標(biāo)。
(四)系統(tǒng)參數(shù)校準(適配實驗室常用耗材,通用校準)
該步驟為基礎(chǔ)校準,適配不同品牌 96 孔酶標(biāo)板,新手一鍵操作即可:
- 進入洗板機校準模式,選擇 “系統(tǒng)參數(shù)校準”,找到 “耗材適配” 選項,選擇實驗室常用的酶標(biāo)板規(guī)格(96 孔標(biāo)準板,孔距 4.5mm);
- 按設(shè)備提示完成載架位置、清洗頭行程的自動校準,校準完成后,設(shè)備會提示 “參數(shù)校準成功”;
- 若實驗室使用特殊規(guī)格酶標(biāo)板,可選擇 “自定義耗材”,輸入孔距、板長、板寬等參數(shù),完成專屬校準。
三、校準后驗證步驟(新手必做,確認校準效果)
- 空載驗證:啟動洗板機,執(zhí)行空載加液、吸液程序,觀察加液針出液均勻,吸液針無異常異響,管路無漏氣、漏液;
- 負載驗證:放入空白酶標(biāo)板,設(shè)置實驗室常規(guī)洗板程序(如加液 200μl,洗板 3 次,吸干),完成后檢查整板加液均勻、無漏液,吸液后無殘留;
- 數(shù)據(jù)驗證:隨機抽取酶標(biāo)板 10 個孔位(含四角、中間),用移液管檢測實際加液量,確認誤差在標(biāo)準范圍內(nèi);
- 記錄留存:填寫《Biotek 洗板機校準記錄表》,記錄校準日期、機型、校準參數(shù)、操作人員、校準結(jié)果,貼在設(shè)備側(cè)面,便于實驗室溯源和下次校準參考。
四、新手校準避坑要點(減少操作失誤,保護設(shè)備)
- 校準全程使用無酶蒸餾水,避免使用含緩沖液、洗滌劑的洗液,防止管路結(jié)晶影響校準精度;
- 調(diào)整加液壓力、吸液壓力時,禁止一次性大幅調(diào)整,每次微調(diào) 5% 以內(nèi),防止壓力過高損壞泵體和針管;
- 針位校準時,力度輕柔,避免強行掰動清洗頭和針管,導(dǎo)致針管彎曲、設(shè)備機械結(jié)構(gòu)損壞;
- 若校準過程中設(shè)備出現(xiàn)故障報警,立即停止操作,先排查故障(如管路堵塞、漏氣),故障解決后再重新校準,禁止帶故障校準;
- 內(nèi)置電池的 Biotek 機型,校準時確保設(shè)備電量充足,避免校準過程中斷電導(dǎo)致參數(shù)丟失。
五、Biotek 洗板機校準周期(實驗室合規(guī)要求)
- 日常校準:更換洗液類型、更換酶標(biāo)板品牌、設(shè)備移動位置后,需立即做簡易校準(加液量 + 針位);
- 定期校準:實驗室常規(guī)使用下,每月做 1 次全套校準,每天做 1 次簡易校準;
- 強制校準:設(shè)備維修后(如泵體更換、針管更換、管路維修),必須做全套校準,校準合格后方可投入使用;
- 年度校準:按實驗室 CNAS、GLP 合規(guī)要求,每年聯(lián)系 Biotek 官方或第三方計量機構(gòu)做一次計量校準,出具校準報告。

